細胞周期檢測實驗是一種通過流式細胞術來分析細胞在細胞周期各階段分布的實驗方法。這個實驗對于理解細胞的生長、分化和疾病狀態(tài)至關重要。

細胞周期檢測實驗步驟：

1. 收集細胞：A: 收集細胞5~20×105于離心管中，若細胞比較小(如淋巴細胞)400 g離心，若細胞比較大(如腫瘤細胞)300 g離心，5~10 min，棄去培養(yǎng)液;

2. 洗滌：加入1 ml冷PBS(提前放4℃預冷)洗滌1次，離心棄去上清;

3. 固定前處理：利用管底殘留的液體，輕彈管底，將沉淀重懸成細胞懸液，避免細胞成團;

4. 細胞固定：加入約1 ml -20℃預冷的無水乙醇中，輕輕吹打混勻，-20℃固定1 h或過夜;

5. 洗滌：加入1 ml冷PBS(提前放4℃預冷)洗滌1次，300 g離心10min，棄去上清;

6. RNA酶消化：300 g 離心 5 min，吸盡上清后，加入 100 μL 的 RNase A 并充分懸浮細胞，37°C 水浴 30 min。

7. PI染色：加入400μL的PI溶液并充分混勻，4℃避光孵育30 min;

8. 上機檢測：用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光，低速獲取細胞，采用分析軟件進行DNA含量分析。