elisa檢測試劑盒隨著重組DNA技術(shù)得到廣泛應(yīng)用以來,生物技術(shù)發(fā)生了質(zhì)的飛躍。很多基因工程產(chǎn)物都是胞內(nèi)物質(zhì),必須將細(xì)胞破壁,使產(chǎn)物得以釋放,才能進(jìn)一步提取,因此細(xì)胞破碎是提取胞內(nèi)產(chǎn)物的關(guān)鍵步驟,破碎方法的得當(dāng)與否,直接影響到所提取產(chǎn)品的產(chǎn)量、質(zhì)量和成本?,F(xiàn)將近年來常用的幾種細(xì)胞破碎方法介紹一下。
1. 高壓勻漿法
設(shè)備是高壓勻漿器,它由高壓泵和勻漿間組成,美國Microfluidics公司和ATS公司均有產(chǎn)品出售。其破碎機(jī)理:細(xì)胞在一系列過程中經(jīng)歷了高速造成的剪刀,碰撞以及由高壓到常壓的變化從而造成細(xì)胞的破碎。
存在的問題;較易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀真菌,較小的革蘭氏陽性首以及有些亞細(xì)胞器,質(zhì)地堅(jiān)硬,易損傷勻漿閥,也不適合用該法處理。
2. 高速珠磨法
設(shè)備是珠后機(jī),瑞士WBC公司和德國西門子機(jī)械公司均各種型號(hào)的珠磨機(jī),其破碎機(jī)下:微生物細(xì)胞懸浮液與極細(xì)的研磨劑在攪拌漿作用下充分混合,珠子之間以及珠子和細(xì)胞之間和互相剪切、碰撞,促使細(xì)胞壁破碎,釋出內(nèi)含物,在珠波分離器的協(xié)助下,珠子被滯留在破碎室內(nèi),漿液流出,從而實(shí)現(xiàn)連續(xù)操作,破碎中,生的熱量由夾套中的冷卻液帶走。
存在的問題:操作參數(shù)多,一般賃經(jīng)驗(yàn)估計(jì)并且珠子之間的液體損失30%左右。
超聲破碎
頻高于15-20KHz的超聲波在高強(qiáng)度聲能輸入下可以進(jìn)行細(xì)胞破碎。其破碎機(jī)理:可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關(guān)。超聲破碎的效率與聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度及首種類型等因素有關(guān)。
存在問題;超聲波破碎在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模應(yīng)用較普遍,處理少量樣品時(shí)操作簡便,液量損失少,但是超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團(tuán)能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活。而且大容量裝置聲能傳遞,散熱均有困難。
4. 酶溶法
就是用生物酶將細(xì)胞壁和細(xì)胞臘消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。
存在的問題;易造成產(chǎn)物抑制作用,這可能是導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)釋放率低的一個(gè)重要因素。而且溶酶價(jià)格高,限制了大規(guī)模利用。若回收溶酶,則又增加百分離純化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌種需選擇不同的酶。
5. 化學(xué)滲透法
細(xì)胞某些有機(jī)溶劑(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來。其作用機(jī)理;化學(xué)滲透取決于化學(xué)試劑的類型以及細(xì)胞壁和膜的結(jié)構(gòu)與組成。
elisa檢測試劑盒存在的問題;時(shí)間長,效率低;化學(xué)試劑毒性較強(qiáng),同時(shí)對(duì)產(chǎn)物也有毒害作用,進(jìn)一步分離時(shí)需要用透析等方法除去這些試劑;通用性差:某種試劑只能作用于某些特定類型的微生物細(xì)胞。
色胺 英文名(EN): Tryptamine (HPLC,≥98%) CAS No.: 61-54-1 規(guī)格(SP): 20MG 類別(Key): 通用試劑
3.4-二羥基苯乙酸 英文名(EN): 3,4-Dihydroxyphenylacetic acid,98% CAS No.: 102-32-9 規(guī)格(SP): 1G 類別(Key): 通用試劑
對(duì)羥基苯甲醇 英文名(EN): 4-Hydroxybenzyl alcohol,99% CAS No.: 623-05-2 規(guī)格(SP): 5G 類別(Key): 通用試劑
鄰苯二甲酸 英文名(EN): Phthalic acid,≥99.5% CAS No.: 88-99-3 規(guī)格(SP): 100G 類別(Key): 通用試劑
5-甲基胞嘧啶 英文名(EN): 5-Methylcytosine (HPLC,≥98%) CAS No.: 554-01-8 規(guī)格(SP): 50MG 類別(Key): 通用試劑
靈芝酸B 英文名(EN): Ganoderenic acid B (HPLC,≥98%) CAS No.: 100665-41-6 規(guī)格(SP): 20MG 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
靈芝酸G 英文名(EN): GANODERIC ACID G (HPLC,≥98%) CAS No.: 98665-22-6 規(guī)格(SP): 20MG 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
三七皂苷Fe 英文名(EN): Notoginsenoside Fe (HPLC,≥98%) CAS No.: 88105-29-7 規(guī)格(SP): 20MG 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
依帕司他 英文名(EN): Epalrestat (HPLC,≥98%) CAS No.: 82159-09-9 規(guī)格(SP): 10MG 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
γ-萜品烯 英文名(EN): γ-Terpinene,≥97.0% CAS No.: 99-85-4 規(guī)格(SP): 25ML 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
反式-2-羥基肉桂酸 英文名(EN): 2-Hydroxycinnamic acid, predominantly ... CAS No.: 614-60-8 規(guī)格(SP): 5G 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品
訶子鞣酸 英文名(EN): Chebulagic acid (HPLC,≥98%) CAS No.: 23094-71-5 規(guī)格(SP): 5MG 類別(Key): 標(biāo)準(zhǔn)品 elisa檢測試劑盒